這種綠色熒光鬼筆環(huán)肽綴合物(相當于FITC標記的鬼筆環(huán)肽)會(huì )選擇性結合F-肌動(dòng)蛋白。鬼筆環(huán)肽衍生物經(jīng)常以納摩爾濃度使用,常在甲醛固定和透化的組織切片、細胞培養或無(wú)細胞實(shí)驗中用于標記、鑒定和定量F-肌動(dòng)蛋白的便捷探針。
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 價(jià)格 |
B0103 | 鬼筆環(huán)肽-熒光素 標記 | 300 Tests | 1896RMB |
操作步驟
1.制備1000 X鬼筆環(huán)肽DMSO儲備液:將30μLDMSO加入小瓶中。
2.制備1X鬼筆環(huán)肽結合物工作溶液:加入1μL1000X鬼筆環(huán)肽結合物DMSO溶液至1mL含1%BSA的PBS中。
注意1:鬼筆環(huán)肽結合物未使用的1000X DMSO儲備溶液應等分并儲存在-20℃,避光。
注意2:不同的細胞類(lèi)型可能染色不同。鬼筆環(huán)肽結合物工作溶液的濃度的制備需要根據實(shí)際而定。
3.染色細胞:
3.1執行甲醛固定,在室溫下將含3.0-4.0%甲醛的細胞在PBS中孵育10-30分鐘。
注意:避免使用任何含甲醇的固定劑,因為甲醇會(huì )在固定過(guò)程中破壞肌動(dòng)蛋白。 優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。
3.2用PBS沖洗固定細胞2-3次。
3.3可選:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定細胞(步驟2.2)3至5分鐘,以增加滲透性。 用PBS沖洗細胞2-3次。
3.4將100μL/孔(96孔板)鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液(來(lái)自步驟1)加入固定的細胞(來(lái)自步驟2.2或2.3)中,并在室溫下染色細胞20至90分鐘。
3.5在加上蓋玻片之前,用PBS輕輕沖洗細胞2至3次以除去過(guò)量的鬼筆環(huán)肽結合物,然后在顯微鏡下進(jìn)行,密封和成像。