Cell Meter 細胞活性檢測試劑盒 綠色熒光

CytoTell 活細胞染色紅色590是用于活細胞染色的探針，流式細胞儀結合熒光染色是一個(gè)強大的分析異質(zhì)細胞群工具。在所有現有的熒光染料CFSE是一種廣泛用于活細胞分析的優(yōu)選細胞增殖的指標。然而，這是不可能用CFSE及其熒光素類(lèi)似物的GFP轉染的細胞，或為其中一個(gè)FITC標記的抗體用于自CFSE及其熒光素類(lèi)似物，具有的激發(fā)和發(fā)射光譜幾乎相同。 CytoTell 染料是主要的激光線(xiàn)，如405納米， 488納米或633納米多色排放。 CytoTell 染料具有最小的細胞毒性，并且是用于多色應用與任何GFP的細胞系或FITC-標記的抗體，它們激發(fā)或發(fā)射光譜的熒光明顯不同。 CytoTell 紅色是紅色熒光染料染色的細胞均勻。 CytoTell 紅也可用于標記細胞的長(cháng)期跟蹤。分析使用兩個(gè)參數的曲線(xiàn)可以更好的提供分辨率。細胞標記的細胞CytoTell 紅可以是固定和透化的，適用于使用標準含甲醛固定劑與基于皂苷的透化緩沖液胞內靶標分析。 CytoTell 紅色為630nm的激發(fā)峰，并且可以通過(guò)紅色（ 633納米）的激光線(xiàn)激發(fā)。它具有660nm的峰值發(fā)射，可以用一個(gè)660/20通道濾波器（相當于APC的Alexa Fluor ? 647 ，和Cy5 ? ） ，使其與利用GFP或FITC標記的抗體的多色細胞分析中的應用兼容被檢測。

Cell Meter檢測試劑盒是一類(lèi)用于檢測細胞功能的系列工具，包括細胞活性、細胞毒性、細胞凋亡、細胞膜電位以及細胞周期等方面的指標。每種檢測方案均能提供不同熒光顏色的檢測方案。這些高效的檢測方案為從多角度研究細胞功能活動(dòng)提供了一種十分有效的方法。Cell Meter細胞活性檢測試劑盒 綠色熒光 使用一種專(zhuān)屬型染料，一旦進(jìn)入活細胞中，其熒光強度增強。這種染料是一種疏水性復合物，可以輕易地進(jìn)入完整的活細胞。通過(guò)細胞內酯酶水解弱熒光性底物，產(chǎn)生具有強烈熒光的親水性產(chǎn)物，并且可以在保持在細胞質(zhì)中。這種酯酶的活性與活細胞數量成比例關(guān)系，因此酯酶水解熒光底物形成的產(chǎn)物的熒光強度與活細胞數量相關(guān)。生長(cháng)在培養板中的細胞可以被染料，且在不到兩小時(shí)內就可以完成定量分析。本檢測法比四唑鹽或者基于A(yíng)larmar Blue的檢測更加強大、穩定。它可以用于許多熒光實(shí)驗平臺的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫組化和流式細胞術(shù)。它在許多研究中非常有用，包括細胞粘附性、趨化作用、藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性研究。本試劑盒提供所有必需組分和最佳檢測方案。它適合于增殖型和非增殖型細胞，也可用于懸浮和貼壁細胞。96微孔板中，每孔用試劑100ul，本試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行500次檢測；384微孔板中，每孔加試劑25ul，本試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行2000次檢測。

1工作溶液配制

將全部?jì)热菸铮?/span>20μL）的CytoCalcein green，AM儲備溶液加入10mL測定緩沖液（組分C）中，并充分混合以制備CytoCalcein green，AM工作溶液。 這種CytoCalcein green，AM工作溶液在室溫下穩定至少2小時(shí)。 注意：如果CHO細胞等細胞含有促進(jìn)熒光染料隨時(shí)間泄漏的有機陰離子轉運蛋白，應制備丙磺舒儲備溶液，并加入到加樣緩沖液中，最終孔內工作濃度范圍為1到2.5 mM。 將未使用的丙磺舒儲備溶液等分并儲存在≤-20℃。

2操作步驟

1.根據需要用測試化合物處理細胞。注意：在添加化合物之前不必洗滌細胞。然而，如果測試的化合物對血清敏感，則可在添加化合物之前吸出生長(cháng)培養基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔（96孔板）和25μL/孔（384孔板）的1X Hank鹽溶液和20mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的緩沖液。或者，細胞可以在無(wú)血清培養基中生長(cháng)。

2.添加100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein green，AM工作溶液。

3.將板在室溫或37°C孵育1小時(shí)，避光。 （孵育時(shí)間可以從15分鐘到過(guò)夜。我們得到了最佳結果，孵育時(shí)間少于4小時(shí)）。注意：適當的孵育時(shí)間取決于所使用的單個(gè)細胞類(lèi)型和細胞濃度。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗的孵育時(shí)間。注意：裝載后請勿清洗電池。注意：對于非粘附細胞，建議在孵育后以800 rpm的速度離心細胞板2分鐘。

4.用Ex / Em = 490 / 525nm的熒光板讀數器監測熒光強度。